高效液相色谱法测定白酒中甜蜜素

本实验用液相色谱法测定白酒中的甜蜜素，对液相色谱法测定白酒中甜蜜素的条件进行了探讨，此方法简便、快速、检出限低，完全适合白酒中甜蜜素检测要求。

甜蜜素，学名为环己基氨基磺酸钠，是我国目前广泛使用的一种甜味剂。其甜度是蔗糖的300~500倍。少数白酒生产企业为改善白酒口感，添加了这种甜味剂。GB/T5009.97-2003甜味剂的检测方法已被卫生部监督司列入不适合白酒检测范围。从2008年1月1日起实施的新国家标准中，只有液态法白酒允许使用食品添加剂调味、调香，其他白酒均不允许使用食品添加剂。为此，白酒中的甜蜜素检测方法已引起行业专家和有关部门的关注。

仪器与试剂

LC-20A高效液相色谱仪（日本岛津），LCsolution工作站，水为二次去离子水，甲醇为色谱纯，甜蜜素标准物质购自国家标准物质中心，次氯酸钠有效氯含量大于8%，碳酸氢钠为优级纯。其他试剂为分析纯。

液相色谱条件

色谱柱ODSHypersil(5(s，150>2mm)；流动相：甲醇氷=8020；流速：1mL/min；检测波长314nm；柱温：室温；进样量:20uL。

实验方法

准确移取10.00mL白酒于50mL分液漏斗中，依次加入2mL(1+5)硫酸、2mL次氯酸钠溶液。充分振摇1min后加入10mL正己烷再充分振摇1min后静置分层，弃去水相，有机相用5%的碳酸氢钠20mL充分洗涤后，经有机滤膜（0.45*m)过滤，进样20+L进行测定，以保留时间定性，峰面积定量。结果见下图。

结果与分析

以0.08mol/LKH2PO4缓冲溶液（pH2.5)作流动相，在260nm处，1.0mL/min的流速下，选用等度洗脱法，10min内可完成啤酒酵母RNA的降解产物——CMP、UMP、AMP、GMP含量的同时测定。4种5'-核苷酸的最小检测限分别为0.2mg/L、0.2mg/L、0.1mg/L和0.3mg/L，平均回收率分别为99.21%、100.39%、100.07%和99.88%，相对标准偏差分别为2.27%、2.83%、2.05%和1.85%。用高效液相色谱法测定白酒中甜蜜素方法简便、快速、准确度高，便于大批量样品的测定。